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            WakoPURE system 體外蛋白質合成系統 - 西寶生物專業提供

            來源:作者:人氣:-發表時間:2015-08-28 11:35:00【

             

            西寶生物為您提供日本和光純藥(WAKO)的體外蛋白質合成系統采用世界首創的再構成系無細胞蛋白質合成技術,對于復制、翻譯及能量再生所需要的約30種因子進行調制、精制后,再加以重新構成。

             
            Wako日本和光純藥(WAKO),全球五大實驗室試劑供應商之一, 全面提供生命科學研究領域的所有試劑,包括生化試劑(含蓋遺傳學,分子生物學,微生物學,糖類,酯類,蛋白質類等),色譜分析其他分析方法(如紅外,滴定,原子吸收)試劑,環境分析試劑(含農獸殘分析,水質分析,大氣分析等),特殊化學品(包括用戶的定制合成,聚合物,電子材料等)。上海西寶生物科技有限公司是Wako的授權一級代理,如您對以下相關產品感興趣,請致電400-021-8158了解進一步詳情。

             

            WakoPURE system 體外蛋白質合成系統
            WakoPURE system采用世界首創的再構成系無細胞蛋白質合成技術,對于復制、翻譯及能量再生所需要的約30種因子進行調制、精制后,再加以重新構成。其中包括大 腸菌的翻譯因子--開始因子(IF1、IF2及IF3)、伸長因長(EF-G、EF-Tu及EF-Ts)、終結因子(RF1、RF2及RF3)、脂質體循 環因子、與20種氨基酸相對應的氨基酰tRNA合成酶、甲硫氨酸酰胺tRNA轉移酶、T7 RNA聚合酶等。此外,還包括脂質體、氨基酸、tRNA、能量源及能量再生系統。
             對于上述構成因子(脂質體蛋白質除外),均添加了組氨酸標簽。通過使用金屬新和樹脂,使反應所需的因子與目標蛋白質之外的構成因子相結合,再通過限外過濾即可除去樹脂結合因子與脂質體蛋白質。采用這種方法,可以在短時間內得到高純度、無標簽的目標蛋白質。
            【特點】
            ● 通過逆反應用標簽系統,使蛋白質的精制變得更容易。
            ● 使天然序列蛋白質的精制更容易。
            ● 由于是重組系,因此不含有雜質蛋白質。
            ● 從合成到精制結束只需要三個小時。
            ● RNase污染極少。
            【擴大反應規模】
            采用WakoPURE system,可以根據需要擴大反應規模。單個產品為50μl。如使用多個產品,則可以實現蛋白質的大量合成。增加反應液并不會影響合成效率。
            使用試劑盒中的二氫葉酸還原酶(DHFR)對照劑,在37°C條件下進行DHFR合成反應一小時后,對每一道使用5μl。然后進行SDS-PAGE,最后用SYPRO RED進行染色。
            【Q&A】
            Q: 所用的模板需要什么條件?
            A: WakoPURE system可用于PCR產物或者質粒。但是,模板需要具備下列序列(亦可以是RNA)。
            ·開始密碼子:(ATG)
            ·終止密碼子:(TAG、TGA或TAA三者之一)
            ·在基因上流應有T7操縱子序列
            ·在開始密碼子的上流約10個堿基處應有脂質體結合部位(SD序列)
            ·在終止密碼子的下流應有6個堿基以上的序列(適用于PCR產物)
            ·在終止密碼子的下流應有復制終止子序列(適用于質粒DNA)
            Q: 蛋白質合成量有多少?
            A: 最大獲取量為100μg/ml。平均合成量為20~50μg。
            編號
            品名
            容量
            299-59501
            WakoPURE System
            (體外蛋白質合成試劑盒)
            4次用
            295-59503
            16次用
             <四次用試劑盒>
            A溶液 .................................. 25μl×4支
            B溶液 .................................. 10μl×4支
            DHFR對照劑 ............................ 5μl×1支
            通用啟發劑 .............................. 80μl×1支
             
            <十六次用試劑盒>
            A溶液 .................................. 25μl×16支
            B溶液 .................................. 10μl×16支
            DHFR對照劑 ..........................5μl×1支
            通用啟發劑 .............................80μl×1支
             在 蛋白質組分析中,經常會使用質譜儀來進行蛋白質的鑒定及翻譯后的修飾。根據電離方法及分析儀的不同組合,質譜儀可以分為多種類型。在測定肽的質譜時,通常 會采用MALDI法(Matrix-assisted Laser Desorption Ionization,即基質輔助激光解附電離法)及ESI法(Electrospray Ionization,即電噴霧電離質譜法)。MALDI法的長處在于可以在短時間內對于多種樣品進行處理,而在使用串聯質譜儀獲取肽的序列信息時,則可 以采用ESI法。MLADI法是將樣本添加在一種被稱為基質(matrix)的化合物上,制成混合結晶,然后再用激光照射其表面以實現離子化。用作基質的 化合物可以是α-氰基-4-羥基肉桂酸(α-Cyano-4-hydroxycinnamic Acid)、芥子酸(Sinapic Acid,SA)或者2,5-二羥基苯甲酸(2,5-Dihydroxybenzoic Acid, DHB)。根據樣本的不同,可選用不同的基質。一般說來,CHCA適用于肽類樣品,SA適用于蛋白質樣品,而DHB則適用于肽、糖類及糖脂類樣品。但是, 對于市面上出售的基質產品,如果不進行任何處理而加以使用,則在質譜分析數據上會出現來源于基質的峰值,本底較高,信噪比較小。因此,對于這些基質,在使用前應進行再結晶處理,以盡可能除去源自基質的峰質。
            本品為一種經過再結晶處理的高純度基質。使用時無須進行再結晶處理即可得到清晰的質譜。
            編號
            品名
            用途
            容量
            037-19261
            α-氰基-4-羥基肉桂酸 [CHCA]
            蛋白質組分析用
            50mg×5支
            192-13361
            芥子酸 [SA]
            蛋白質組分析用
            50mg×5支
            044-29101
            2,5-二羥基苯甲酸 [DHB]
            蛋白質組分析用
            50mg×5支
            編號
            品名
            用途
            容量
            125-05061
            賴氨酰肽鏈內切酶,質譜分析級
            蛋白質組分析用
            20μg×5支
            202-15951
            豬胰島素,質譜分析級
            蛋白質組分析用
            20μg×5支
            293-57701
            陰性膠片染色劑質譜分析套裝
            電泳分析用
            20次
            299-58901
            銀染試劑質譜分析套裝
            電泳分析用
            20次

             

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