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            酵母(S.cerevisiae )直接轉化試劑盒

            來源:Seebio.cn作者:西寶生物人氣:-發表時間:2012-02-09 14:51:00【
            酵母(S.cerevisiae )直接轉化試劑盒
            本品為出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)轉化試劑盒。無需預先進行菌體離心、洗凈操作,可直接向酵母培養液加入目標質粒和專用試劑,是一步即可完成轉化的試劑。值得一提的 是利用96孔板可導入多種檢體,簡單加入4850種重組體也成為可能,因而可進行染色體的篩選。
            [特點]
            ·加入了目標質粒和專用試劑的一步完成型。
            ·感受態細胞無需調制。
            ·使用96孔板可進行多檢體處理。
            ·適應HT的低粘性試劑。
            [轉化效率]
            向BY4737株導入pRS316時的轉化效率。
             
            形質轉化效率 (cfu/μg)
            軟管法
            ≥5,000
            96孔感光板法
            ≥500
            [試劑盒內容]   
             
            20次用
            100次用
            500次用
            Sc Transformation Reagent
            500μl
            2.5ml
            12.5ml
            Carrier DNA(5μg/μl)
            50μl
            250μl
            1.25ml
            [操作方法]
            ■ 軟管法
            <酵母的培養>
            2ml YPD培養基
            ↓←菌種接入,調制至OD600:0.01
            ↓←取1ml至14ml的試管中
            ↓←在28~30℃振蕩培養,至OD600:3.5~5.0
            培養酵母液……(A)
            <轉化>
            1.5ml的離心管
            ↓←將25μl質粒和試劑混合液混合
            ↓←加入25μl培養酵母液(A)在42℃恒溫箱中放置2小時
            ↓←加入150μl滅菌水
            預處理
            ↓在28~30℃的恒溫箱中放置2~3天
            轉化后的酵母
            ■  96孔板法
            96孔板             
            ↓←加入25μl YPD培養基
            菌種接入
            ↓在28~30℃情況下靜置培養18~24
            菌體懸濁
            ↓←將25μl質粒和試劑混合液混合
            在37℃的恒溫箱中放置2小時
            5~10μl  spotting
            ↓在28~30℃的恒溫箱中放置2~3日
            轉化的酵母
            *質粒·試劑混合液 (25μl /管, 25μl/孔)
            ·Sc Transformation Reagent…20μl
            ·質粒DNA………………………1μg
            ·Carrier DNA……………………2μl
             調制25μl滅菌水
            [保存條件]
            -20℃保存
            [產品資料]
            產品編號
            品名
            規格
            容量
            296-62701
            S.Cerevisiae Direct Transformation Kit, Wako 酵母(S.cerevisiae )直接轉化試劑盒
            基因研究用
            20次用
            292-62703
            100次用
            290-62704
            500次用
             
            西寶生物大樓
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